淋巴細(xì)胞分離液可用于體外分離外周淋巴血細(xì)胞,也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞,適用于從血液及組織勻漿中分離所需細(xì)胞,在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物中廣泛應(yīng)用。其他人及動物多種比重細(xì)胞分離液。
淋巴細(xì)胞分離液操作步驟是哪些?今天由重慶市華雅的小編給大家介紹下。淋巴細(xì)胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的分離,也適用于大多數(shù)哺乳動物單個核細(xì)胞的分離。具有低毒、高得率、高純度等特點。
使用操作步驟:
?。?)取新鮮抗凝全血或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。
?。?)在離心管中加入適量分離液,將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。
?。?)室溫,水平轉(zhuǎn)子500~1000g,離心20~30min。
?。?)離心后將出現(xiàn)明顯的分層:最上層是稀釋的血漿層,中間是透明的分離液層,血漿與分離液之間的白膜層即為淋巴細(xì)胞層,離心管底部是紅細(xì)胞與粒細(xì)胞。
?。?)小心的吸取白膜層細(xì)胞到15mL潔凈的離心管中, 10mL PBS或細(xì)胞洗滌液洗滌白膜層細(xì)胞。250g,離心10min。
?。?)棄上清,5mL的PBS或細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞,250g,離心10min。
(7)重復(fù)步驟6;
?。?)棄上清,細(xì)胞重懸備用。
淋巴細(xì)胞分離液原理是什么?
重慶市華雅告訴大家血液中單獨核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,其容積、形狀和溶解度與別的細(xì)胞不一樣,淋巴細(xì)胞分離液是某種密度接近1.075∽1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相對密度梯度分布,進而將各類血細(xì)胞多方面分離。
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